技術(shù)服務(wù)
技術(shù)專(zhuān)題
聯(lián)系我們
廣州賽誠生物科技有限公司
廣州市天河區黃埔大道中124號2705室
電話(huà):020-29031124
手機:18102256923
Email:servers@gzscbio.com
Fax:020-85625352
QQ:2913120624
廣州市天河區黃埔大道中124號2705室
電話(huà):020-29031124
手機:18102256923
Email:servers@gzscbio.com
Fax:020-85625352
QQ:2913120624
您當前所在的位置:首頁(yè)>>技術(shù)專(zhuān)題(停用)
>>miRNA與lncRNA研究策略專(zhuān)題
>>miRNA與lncRNA研究實(shí)驗
>>熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
為取得最佳測定效果,在用單管的熒光測定儀測定時(shí),樣品和測定試劑混合后到測定前的時(shí)間應盡量控制在相同時(shí)間內,例如30秒內。
由于溫度對酶反應有影響,所以測定時(shí)樣品和試劑均需達到室溫后再進(jìn)行測定。
為保證熒光素酶檢測試劑的穩定性,可以采取適當分裝后避光保存的方法,以避免反復凍融和長(cháng)時(shí)間暴露于室溫。一般來(lái)說(shuō),如果不分裝使用三次(期間凍融三次),對測定結果無(wú)明顯影響。
樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進(jìn)行測定。測定時(shí)間通常為10秒,根據情況也可以測定更長(cháng)或更短時(shí)間,但是同一批樣品最好使用相同的測定時(shí)間。
為避免由于質(zhì)粒轉細胞時(shí)效率的差異而帶來(lái)的誤差,可以同時(shí)轉入Renilla熒光素酶的報告基因質(zhì)粒作為內參,采用雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒進(jìn)行檢測;也可以同時(shí)轉入β-半乳糖甘酶報告基因質(zhì)粒作為內參,然后采用β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒進(jìn)行檢測。采用熒光素酶報告基因檢測試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品,可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒中的測定。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
目錄瀏覽
- 1 . miRNA的概述
- 2 . lncRNA的概述
- 3 . miRNA與lncRNA研究策略
- 4 . miRNA與lncRNA研究實(shí)驗
- 4.1. RNA 結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)Model Figures
- 4.2. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)實(shí)驗流程
- 4.3. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
- 4.4. RNA pull - down Model Figures
- 4.5. RNA pull- down實(shí)驗流程
- 4.6. RNA pull- down實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
- 4.7. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)Model Figures
- 4.8. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗流程
- 4.9. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題