MicroRNAs（miRNAs）是在真核生物中發(fā)現的一類(lèi)內源性的具有調控功能的非編碼RNA，其大小長(cháng)約20~25個(gè)核苷酸。從發(fā)夾結構前體加工而來(lái)，形成具有基因調控功能的成熟小分子非編碼 RNA。這個(gè)過(guò)程是由較長(cháng)的初級轉錄物，經(jīng)過(guò)一系列核酸酶的剪切加工而產(chǎn)生。隨后組裝進(jìn)RNA誘導的沉默復合體（RNA-induced silencing complex，RISC），通過(guò)堿基互補配對的方式識別靶mRNA，能與受其調控的靶mRNA的3’非編碼區（3’-UTR）互補結合，并根據互補程度的不同指導沉默復合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。

miRNA廣泛參與細胞增殖、分化、凋亡及細胞周期調控等過(guò)程。研究證明，miRNA參與各種各樣的調節途徑，包括發(fā)育、病毒防御、造血過(guò)程、器官形成、細胞增殖和凋亡、脂肪代謝等等。miRNA 與細胞的癌變及多種腫瘤的發(fā)生有著(zhù)極為密切的關(guān)系，其可作為一種新的癌基因或抑癌基因參與癌癥的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉移。miRNA基因通常是在核內由RNA聚合酶II（polI）轉錄的，最初產(chǎn)物為大的具有帽子結構（7MGpppG）和多聚腺苷酸尾巴（AAAAA）的pri-miRNA。成熟的 miRNA 是由較長(cháng)的有發(fā)夾結構的前體轉錄產(chǎn)物經(jīng)Dicer 酶加工而來(lái)的。miRNA 基因存在于基因組的基因間隔區、外顯子區或者基因的內含子當中。

圖1  miRNA前體結構

miRNA具有以下特點(diǎn)：

1 廣泛存在于真核生物中，是一組不編碼蛋白質(zhì)的內源性單鏈短序列小分子RNA，它本身不具有開(kāi)放閱讀框架（ORF）。通常的長(cháng)度為18-25 nt，但在3’端可以有1-2 個(gè)堿基的長(cháng)度變化。

2 成熟的miRNA 5’端有一磷酸基團，3’端為羥基，兩者可以和上游或下游的序列不完全配對形成莖環(huán)結構。這一特點(diǎn)使它與大多數寡核苷酸和功能RNA 的降解片段區別開(kāi)來(lái)。

3 多數miRNA具有高度保守性、時(shí)序性和組織特異性。miRNA不僅在結構上保守，而且在物種間具有高度的進(jìn)化保守性。細胞特異性和組織特異性是miRNA表達的主要特點(diǎn)。

4 miRNA基因以單拷貝、多拷貝或基因簇等多種形式存在于基因組中，而且絕大部分位于基因間隔區（intergenic region，IGR）。

5 70 %的哺乳動(dòng)物miRNA基因是位于TUs區。

• 1 . miRNA的概述
  • 1.1. miRNA的生物發(fā)生
  • 1.2. miRNA的作用機制
  • 1.3. miRNA的研究展望
  • 1.4. miRNA與癌癥
  • 1.5. miRNA在轉化醫學(xué)中的應用
• 2 . lncRNA的概述
  • 2.1. lncRNA的研究背景
  • 2.2. lncRNA的作用機制
  • 2.3. lncRNA的研究展望
  • 2.4. lncRNA與癌癥
  • 2.5. lncRNA與臨床疾病
• 3 . miRNA與lncRNA研究策略
  • 3.1. miRNA的一般研究策略
  • 3.2. AGO2在miRNA研究中的應用
  • 3.3. LncRNA的一般研究策略
  • 3.4. miRNA與lncRNA的生物信息學(xué)預測
• 4 . miRNA與lncRNA研究實(shí)驗
  • 4.1. RNA 結合蛋白免疫沉淀技術(shù)（RIP）Model Figures
  • 4.2. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)（RIP）實(shí)驗流程
  • 4.3. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)（RIP）實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
  • 4.4. RNA pull - down Model Figures
  • 4.5. RNA pull- down實(shí)驗流程
  • 4.6. RNA pull- down實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
  • 4.7. 熒光素酶檢測技術(shù)（Luciferase）Model Figures
  • 4.8. 熒光素酶檢測技術(shù)（Luciferase）實(shí)驗流程
  • 4.9. 熒光素酶檢測技術(shù)（Luciferase）實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題