實(shí)驗相關(guān)產(chǎn)品

實(shí)驗技術(shù)流程

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實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題

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結果分析

      在分析轉錄調控作用位點(diǎn)時(shí)，一般先采取Luciferase片段缺失實(shí)驗初步分析，確定目標調控因子是否調控目標基因的轉錄及大概的作用區域。對縮小范圍的區域進(jìn)行生物信息學(xué)預測可能位點(diǎn)后，采用Luciferase定點(diǎn)突變實(shí)驗確定真正的轉錄調控位點(diǎn)。標準結果及結論如下所示：

      1 Luciferase片段缺失實(shí)驗

      經(jīng)檢測發(fā)現多次裁切對熒光素酶表達量產(chǎn)生的影響相同（即檢測組與空白組有明顯差異，但各裁切的檢測組間沒(méi)有明顯差異），故可推斷轉錄調控位點(diǎn)應位于-282~近啟動(dòng)子端區域。

      2 Luciferase定點(diǎn)突變實(shí)驗

      對不同位點(diǎn)（生物信息學(xué)預測）分別進(jìn)行點(diǎn)突變，LXRE2位點(diǎn)突變后的檢測組與野生型的檢測組間存在明顯差異，而LXRE1位點(diǎn)突變后的檢測組與野生型的檢測組間沒(méi)有明顯差異，故可推斷轉錄調控位點(diǎn)應為L(cháng)XRE2。

• 1 . 基因表達調控概述
  • 1.1. 轉錄調控與轉錄激活
  • 1.2. 轉錄后調控
  • 1.3. miRNA與lncRNA
• 2 . 基因表達調控研究進(jìn)展
• 3 . 基因表達調控研究方法
• 4 . 基因表達調控主要實(shí)驗技術(shù)
  • 4.1. 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù) ChIP
  • 4.2. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù) RIP
  • 4.3. RNA pull-down
  • 4.4. DNA pull-down
  • 4.5. 熒光素酶檢測技術(shù) Luciferase
  • 4.6. 凝膠遷移/電泳遷移率實(shí)驗 EMSA