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miRNA在細胞分化、生物發(fā)育及疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮巨大作用,越來(lái)越多的引起研究人員的關(guān)注。
新一代測序技術(shù)很快就能幫助我們解決很多問(wèn)題:到底存在多少種miRNA?這些miRNA是怎么產(chǎn)生的?它們的生物學(xué)功能是什么?這些miRNA調控機制又是如何被調控的?多種miRNA的5’端或3’端會(huì )被修飾,那么現有的測序技術(shù)能夠應付細胞里所有的miRNA分子嗎?
不過(guò)我們依舊面臨巨大的挑戰——弄清楚RNA結合蛋白是如何影響miRAN干擾途徑最終的調控結果的。這是因為細胞內的RNA通常都是以與各種蛋白質(zhì)相結合的方式存在的。這些蛋白可以調控基因表達。比如,我們借助結合了免疫沉淀技術(shù)和高通量測序技術(shù)的體內全基因組技術(shù)(genome-wide in vivo approache)來(lái)研究蛋白質(zhì)-mRNA相互作用,并找出與RNP復合體相互結合后能抑制基因表達的mRNA上的結合位點(diǎn)。
RNA沉默途徑中活性和特異性的變動(dòng)也會(huì )令基因表達出現定量和定性突變,從而形成一套全新的基因表達調控網(wǎng)絡(luò )。這種變動(dòng)會(huì )影響多個(gè)過(guò)程,甚至包括人類(lèi)進(jìn)化過(guò)程。由于所有的脊椎動(dòng)物幾乎都有同樣數目的編碼基因,因此我們很難從這個(gè)方面進(jìn)行判斷。與其它的哺乳動(dòng)物不同,人類(lèi)大腦在出生后還會(huì )以胎兒期的生長(cháng)速度繼續發(fā)育,因此人體大腦是我們研究發(fā)育時(shí)期出現突變的絕佳材料。很多人都想知道,如果我們改變了大腦的發(fā)育速度是否會(huì )讓人類(lèi)進(jìn)化成另一個(gè)新物種。
另一方面,盡管miRNA的研究還非常年輕,但是可以使用它來(lái)進(jìn)行治療的疾病卻非常廣泛。其中,包括了帕金森氏癥、肌萎縮側索硬化癥(Lou Gehrig’s disease)、艾滋病、滲出性老年性黃斑變性、II型糖尿病、肥胖癥、高膽固醇血癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎、呼吸系統疾病以及腫瘤等等。
隨著(zhù)對于miRNA作用機理的進(jìn)一步的深入研究,以及利用最新的例如miRNA芯片等高通量的技術(shù)手段對于miRNA和疾病之間的關(guān)系進(jìn)行研究,將會(huì )使人們對于高等真核生物基因表達調控的網(wǎng)絡(luò )理解提高到一個(gè)新的水平。這也將使miRNA可能成為疾病診斷的新的生物學(xué)標記,還可能使得這一分子成為藥靶,或是模擬這一分子進(jìn)行新藥研發(fā),這將可能會(huì )給人類(lèi)疾病的治療提供一種新的手段。
不過(guò),就目前來(lái)說(shuō),我們依然存在很多阻礙miRNA研究走向臨床的問(wèn)題。如果不解決miRNA分子遞送途經(jīng)的安全問(wèn)題、療效問(wèn)題以及可靠性問(wèn)題,我們就無(wú)法使miRNA治療技術(shù)真正造?;颊?。在這個(gè)問(wèn)題上,使用全身給藥法進(jìn)行靶向遞送,開(kāi)發(fā)新型的非侵入式成像方法(如,近紅外燃料對小RNA分子進(jìn)行標記的方法來(lái)監測體內miRNA分子的遞送情況),也將會(huì )非常有幫助。這樣,我們就能及時(shí)掌握組織器官對藥物的攝取情況以及藥物的生物分布情況。
- 1 . miRNA的概述
- 2 . lncRNA的概述
- 3 . miRNA與lncRNA研究策略
- 4 . miRNA與lncRNA研究實(shí)驗
- 4.1. RNA 結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)Model Figures
- 4.2. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)實(shí)驗流程
- 4.3. RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)(RIP)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
- 4.4. RNA pull - down Model Figures
- 4.5. RNA pull- down實(shí)驗流程
- 4.6. RNA pull- down實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題
- 4.7. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)Model Figures
- 4.8. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗流程
- 4.9. 熒光素酶檢測技術(shù)(Luciferase)實(shí)驗常見(jiàn)問(wèn)題