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3D基因組之ChIP-seq
3D基因組之ChIP-seq
基因組的三維立體結構的主要組成是DNA和蛋白質(zhì)。研究基因組的三維立體結構就是研究DNA與蛋白之間的互作。ChIP一直是研究蛋白與DNA互作的重要方法。他可以顯示眾多調節蛋白在基因組上的分布。下表是生物體內常見(jiàn)的幾種DNA調節蛋白。
Histone是核小體的基本組成蛋白,核小體是染色質(zhì)的基本組成單位。組蛋白的修飾(如:甲基化,乙?;?,磷酸化等)使核小體在DNA上發(fā)生移動(dòng),改變核小體的位置。這使得特定的組蛋白修飾代表特定的生物學(xué)特征。例如H3K27ac代表激活型啟動(dòng)子區域,H3K27me3代表抑制型啟動(dòng)子區域,等等。
除了組蛋白外,還有一類(lèi)重要的調控元件-轉錄因子來(lái)調節染色質(zhì)的結構和功能,然而,轉錄因子要與RNA聚合酶II互作,才可以調控基因表達。
CTCF是一類(lèi)重要的絕緣子蛋白,與RAD21蛋白形成穩定的3維立體結構區域,維持染色質(zhì)的正常形態(tài)。
另外,您需要根據目的基因的表達情況選擇相應的ChIP組合方式。
ChIP-seq數據分析
ChIP-seq的數據呈現形式是多種多樣的。但主要以3種形式出現在文章中。
1.最常見(jiàn)的peak圖
2.研究轉錄起始位點(diǎn)的TSS距離分布圖,可以清楚的觀(guān)察到TSS位點(diǎn)處,多種蛋白的分布情況。
3.比較直觀(guān)的熱圖,可以清楚的看出同一DNA區域,不同蛋白的分布情況,以及同一蛋白在不同DNA區域的分布情況。
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