技術(shù)服務(wù)描述

HIV慢病毒包裝

HIV慢病毒是一種逆轉錄病毒。在逆轉錄酶的作用下，以病毒RNA為模版合成從DNA，再通過(guò)DNA復制、轉錄、翻譯等過(guò)程形成病毒顆粒。HIV慢病毒表達系統是一種新的重組蛋白高效表達系統，由HIV慢病毒載體（病毒載體已去除致病基因，可插入目的基因或siRNA序列）、輔助載體（表達病毒包裝需要的蛋白質(zhì)，如：VsVg，gag/pol，Tat，Rev）和包裝細胞系組成。HIV慢病毒載體在外源基因表達、基因沉默、基因治療、生物制藥等得到廣泛的應用。

服務(wù)優(yōu)勢

1轉染范圍廣，可感染各種細胞類(lèi)型，如淋巴細胞、肝細胞、肌細胞、神經(jīng)細胞等。

2 轉入的外源基因可完全整合到染色體上，可建立穩定表達外源基因的細胞系。

3 對細胞感染率高，可達100%。

4 感染細胞不產(chǎn)生病變。

服務(wù)內容：

穩定沉默目的基因

服務(wù)流程：

1 設計shRNA序列

2 構建含目的基因shRNA的 HIV慢病毒表達載體

3 表達載體和輔助質(zhì)粒共轉染293T細胞

4 收集HIV慢病毒上清

5 濃縮病毒濾液，測定病毒低度

6 將適當滴度的病毒均勻撒入待感染細胞

客戶(hù)提供：

所要敲減的外源基因名稱(chēng)

所研究的細胞株

我們提供：

提供重組后的HIV慢病毒載體，穩定表達細胞系的qPCR和Western檢測結果